GenWand™ dsDNAはPCRによって作製されたdsDNAよりも80%以上導入効率が高い(38 % vs 21 %)。
HEK293細胞のRAB11A locusにエレクトロポレーションで5 μgのPCR dsDNAおよびGenWandTMdsDNAを用いた場合のGFPのKI効率。
二本鎖DNA（dsDNA）は、高い編集効率で遺伝子をノックインするために、CRISPR相同組換え修復（HDR）テンプレートとして使用されます。GenWand™ dsDNAは、非相同末端結合のリスクを緩和、およびノックイン精度を高めるため、共有結合的に末端をクローズドエンドな形で開発されました。 GenScriptは現在、スクリーニング、プロセス最適化およびスケールアップに理想的な、最大グラムレベルのクローズドエンドdsDNAを提供しています。
二本鎖DNA（dsDNA）
50 µg / itemから開始、出荷まで最速3週間
| 納品量 | 1000-3000bp | 3000-5000bp | 5000-10000bp |
|---|---|---|---|
| 50ug | 192,000円から | 384,000円から | 400,000円から |
| 100ug | 240,000円から | 432,000円から | 448,000円から |
| 200ug | 304,000円から | 528,000円から | 624,000円から |
| ＞200ug | お問い合わせ | ||
| 品質試験の仕様 | 検出法 | 出荷判定基準 | 研究グレード |
|---|---|---|---|
| 純度 | アガロースゲル電気泳動 | シングルバンド |
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| 配列の精度 | サンガーシークエンシング | 100%の配列アラインメント確認 |
✔
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| 光学密度 | 260 nm/230 nm ( 分光光度計 ) | ≥ 2.0 |
✔
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CRISPRベースの遺伝子挿入、置換、または修正
CRISPR HDRベース遺伝子編集のメカニズム
CRISPR/Cas9技術は、ターゲットDNA部位へ正確な二本鎖切断（DSBs）を生じさせるために、汎用されています。ガイドRNA（gRNA）はCas9と複合体を形成した後、ターゲットDNA上のプロトスペーサー隣接モチーフ（PAM）配列を認識します。Cas9は、そのエンドヌクレアーゼ機能を発揮して、DSBsを生じさせます。これは修復に二つのメカニズムを引き起こします。一つは非相同末端結合（NHEJ）で、DSB部位に変異を導入します。他のメカニズムは相同組換え修復（HDR）で、ドナーDNAを切断部位に挿入し、遺伝子ノックインを作製できます。
GenWand™ dsDNAはPCRによって作製されたdsDNAよりも80%以上導入効率が高い(38 % vs 21 %)。
HEK293細胞のRAB11A locusにエレクトロポレーションで5 μgのPCR dsDNAおよびGenWandTMdsDNAを用いた場合のGFPのKI効率。
