背景
- ヒトリコンビナントBMP9タンパク質、鎖内に3つのジスルフィド結合、および鎖間に1つのジスルフィド結合
主な課題
- 大腸菌で発現させた場合、可溶化状態での発現が困難
- CHO細胞では最大 2 mg/L
最適化
- 封入体の処理と変性プロセス
- 希釈リフォールディング法によるリフォールディングバッファーのスクリーニング
結果
- 最終収量：73 mg/L
- SEC-HPLC純度：最大99%
リコンビナントタンパク質の産生は、必ずしも容易ではありません。多くの要因がタンパク質発現と精製に影響する可能性があるため、その最適化プロセスには常に労力と時間がかかります。いくつかの不確実性と課題に対処するため、GenScriptのタンパク質発現の専門家は、最先端のソリューションによる微生物発現カスタムサービスを提供しています。コドン最適化からスモールスケールの発現評価試験およびスケールアップのための遺伝子合成、そしてタンパク質の精製とキャラクタライゼーションも含めて、お客様はご要件に沿ってフレキシブルにオプションをお選び頂けます。さらに、ラージスケールでの製造には、生物学的機能を持つタンパク質を封入体から回収する、当社開発の特殊なタンパク質リフォールディング技術もご利用頂けます。ハイスループットな大腸菌発現プラットフォームでは、お客様のターゲットスクリーニングプロジェクトの迅速化を支援するため、スモールスケール発現向けに費用対効果の良いオプションを提供しています。
よく用いられている発現系である大腸菌は、遺伝子操作が簡単です。そして幅広いリコンビナントタンパク質、例えばサイトカイン、酵素、抗原や抗体フラグメント等の、低費用で高収量な生産を支えています。当社のカスタマイズしたワークフローは、お客様のダウンストリームアプリケーションに対応可能です。GenScriptは、大腸菌発現系を使用し、50,000バッチ以上のリコンビナントタンパク質のお届けに成功しています。
| マイルストーン | 仕様 | 納品物 | タイムライン* | |
|---|---|---|---|---|
| 1 | 遺伝子合成、クローニング、プラスミド調製 |
|
|
≤2 週間 |
| 2 | タンパク質発現評価 |
|
≤1 週間 | |
| 3 | タンパク質精製、タグ除去（オプション）およびリフォールディング（オプション） |
|
≤1 週間 | |
| 4 | 品質管理 (QC) と納品 |
|
≤1 週間 |
注:
*タイムラインは全て概算です。多くの場合、4～6週間でのお届けとなります。ただし、オプションによって全体のタイムラインが若干伸びる場合があります。（国際輸送期間によっても変動がございます）
ラージスケールでのタンパク質産生のご希望は、完全カスタマイズ可能な当社の大腸菌発酵槽大量生産サービスをお試しください。詳細は当社の技術担当マネージャーへご相談下さい。
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主な課題
最適化
結果
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主な課題
最適化
結果
