結果: 従来のプラスミドを用いた方法と比較して遺伝子ノックイン効率が最大 30% 向上
- CRISPRノックイン(2.5 kbの挿入)
- トランスポゾン遺伝子ノックイン (4.8 kb フラグメント)
| サービス名 | グレード | GOI 長さ | 収量 | 提供形状 | 納期 # | アプリケーション |
|---|---|---|---|---|---|---|
| GenCircle dsDNA | HighPure | 1-20 kb | 100 μg - g | 凍結粉末もしくは溶液 (バッファーはオプション) |
2週間～ |
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| UltraPure |
|
1) GenScriptで遺伝子合成をし、その後GenCircle dsDNAを合成する
2) お客様よりGOIを含むプラスミドを提供いただき、そこからdsDNAを合成する #その他のGOIの長さ、および収量をご希望の場合には直接お問い合わせください
3）液体製品を納品する場合に、追加送料があります
| QC Items | QC Standards | HighPure Grade | UltraPure Grade |
|---|---|---|---|
| Concentration by A260 | Guaranteed quantity | ||
| Identity by Sanger Sequencing | Correct sequence | ||
| Identity by Restriction Analysis | DNA bands of expected sizes detected by agarose gel electrophoresis (AGE) | ||
| Purity by A260/280 | 1.8-2.0 | ||
| Plasmid Topology by AGE | ≥ 90% supercoil | ||
| Bioburden by Inoculation Test | No bacterial/ fungal growth after 48 hours | ||
| Endotoxin | ≤ 0.01 EU/μg by Gel Clot Test | ||
| ≤ 0.005 EU/μg by Chromogenic TAL Assay | |||
| Residual Host RNA by AGE | No bands detected | ||
| Residual Host DNA | Non-detectable by AGE Gray Scale Analysis (GIS=0) | ||
| ≤ 5% by qPCR | |||
| Residual Host Protein by HCP ELISA | ≤1% | ||
| pH by pH-metry | TE Buffer: 8.00 ±0.50 | ||
| ddH2O: (5.00-7.00) ±0.50 | |||
| PBS: 7.40 ±0.50 | |||
| Tris: 7.88 ±0.50 |
結果: 従来のプラスミドを用いた方法と比較して遺伝子ノックイン効率が最大 30% 向上
結果: 従来のプラスミドと比較して、ウイルスの力価が最大 3 倍 c、ITR配列がより安定し、耐性遺伝子の使用も避けられた。 • 慢病毒包装
| 名称 |
ウィルス価 (IFU/ml) |
抗生物質耐性遺伝子 |
|---|---|---|
| pRRL-PGK-EGFP （通常のプラスミド） |
1.23E+8 | 検出 (Ct値 <30) |
| pRRL-PGK-EGFP MF （GenCircle dsDNA） |
3.81E+8 | 未検出 (Ct値≥35) |
| 名称 |
ウィルス価 (IFU/ml) |
抗生物質耐性遺伝子 |
|---|---|---|
| CMV EGFP AAV2 （通常のプラスミド） |
1.12E+12 | 2% |
| CMV EGFP MF （GenCircle dsDNA） |
1.22E+12 | 未検出 |
結果： 従来のプラスミドと比較して、転写産物レベルが最大4倍増加し、免疫応答が低下
結果： 蛋結果: 従来のプラスミドと比較して、タンパク質発現量が最大39% 増加した
GenCircle dsDNAサービスは、さまざまな長さのターゲット遺伝子を対象として、これまでに世界で数々の注文をお受けしています。
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